SeqBench

全质粒测序结果核对

拖入测序公司发回的结果和你的质粒图谱,一个订单的所有样品一次核对完。

全质粒纳米孔测序返回的是一条组装好的环状一致序列,而比对本身就有三个麻烦:组装从任意位置开环,一半情况下给的是反向互补链,同聚物里的 1 bp 插入或缺失既是最常见的测序伪差,也正是真实移码突变的样子。把你的质粒图谱(SnapGene .dna 或 GenBank)和测序公司发回的结果——整个订单的结果 .zip,或者单个一致序列 FASTA——拖进来,每个样品都会自动校正旋转和方向,在你的图谱坐标上列出每个差异,并说明它对蛋白的影响。测序服务商公布的两类纳米孔已知错误——长度超过 9 的同聚物和 Dam / Dcm 甲基化位点——会单独标出,提醒你先用 Sanger 确认;组装成二聚体或三聚体的一致序列会被识别出来,按单个拷贝比对。

工具界面目前为英文:拖入文件或粘贴序列即可,结果中的数字与图表和英文版完全相同。

0 bp. An annotated record is what turns a position into “silent in AmpR” or “a stop at codon 41”.

0 bp

使用步骤

  1. 1拖入你的质粒图谱(.dna 或 .gb),或粘贴序列。
  2. 2拖入测序公司发回的结果 .zip,或单个一致序列 FASTA / GenBank。
  3. 3一个订单有多个样品时,表格中每个样品一行结论;点开查看每个差异。

常见问题

一致序列和我的图谱起点不一样,有关系吗?

没有关系。组装软件从任意位置开环,两条序列几乎从不按原样对齐。本页会自动找到旋转位置,必要时取反向互补,并告诉你移动了多少。

哪些差异需要用 Sanger 再确认?

标为 “known nanopore error context” 的差异:位于长度 10 以上的同聚物中,或位于 E. coli Dam(GATC)/ Dcm(CCWGG)甲基化位点上。这是测序服务商自己公布的两类纳米孔错误模式,在重新挑克隆或丢弃之前,先用一条 Sanger 读段确认。

更多中文入口见 SeqBench 中文。